U eksperimentima lančane reakcije (PCR), pakiranje reagenata i uzoraka direktno utječe na tačnost i sigurnost eksperimentalnih rezultata. Standardni postupci PCR pakiranja moraju se strogo pridržavati principa sterilnosti, zagađenja i jasnog označavanja. Specifični postupci su navedeni u nastavku.
1. Priprema
Prije nego što nastavite, nosite laboratorijski kaput, rukavice i masku kako biste osigurali čisto okruženje (preporučuje se čisto okruženje (čista kluba ili ormar za biološku sigurnost). Provjerite da su svi potrošni materijal (npr. Centrifuge cijevi, PCR ploče) besplatne zagađene Dnase / Rnase i koriste autoklaved ili enzim - besplatne sterilizatore. Reagensi (npr., Temeljni premazi, predložak DNK, enzimi itd.) Trebaju biti univotirani u pojedine bočice kako bi se izbjeglo opetovano zamrzavanje - ciklusa odmrzavanja.
2. Alikvoting i označavanje
Aliquoting reagens: Koristite pipetu za izdavanje master miksa, prajmera itd. U centri za centrifuge ili PCR ploče, u skladu s eksperimentalnim potrebama, precizno se doziva svaku količinu na najbliži mikrolitar. Koristite savjete za jednokratnu pipetu kako biste izbjegli križnu - zagađenje.
Standardi za označavanje: Svi spremnici moraju biti jasno označeni imenom, koncentracijom, datumom i brojem operatera. Vodootporne naljepnice ili direktno graviranje preporučuju se kako bi se spriječile nečitljive oznake.
3. Pakovanje i brtvljenje
Nakon alikvotinga, odmah pooštrite kape cijevi centrifuge ili brtvite PCR ploče (pomoću topline - brtvenog filma ili specijalizirani ljepljivi film) da biste spriječili curenje. Za dugoročno pucanje pojma, preporučuje se stavljanje ambalaže u zapečaćenu torbu i dodavati bistricu (poput silika gela perlica) za održavanje suvog okruženja.
4 Skladištenje i transport
Nakon ambalaže, PCR reagensi trebaju se pohraniti odvojeno u - 20 stepeni (dugo - termin) ili 4 stepena (kratkoročno) kako bi se izbjegle fluktuacije temperature. Transport treba izvesti u izoliranom spremniku ispunjen materijalom za jastuke za sprečavanje šoka i curenja. Za bioložne uzorke, potrebna je usklađenost sa zahtjevima za pakiranje biološke sigurnosti pod UN 3373 ili relevantnim propisima.
Standardizirani postupci PCR ambalaže su neophodni za eksperimentalnu pouzdanost. Stroga aseptična kontrola i jasno označavanje mogu učinkovito smanjiti rizike za kontaminaciju i osigurati tačnost podataka.
